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宜城教育资源网www.ychedu.com免费1.2《基因工程的基本操作程序》随堂达标检测含教学反思案例教案学案说课稿|人教版高中生物选修三1.限制性核酸内切酶EcoRⅠ对DNA的识别序列是5′GAATTC3′,当用它处理环状DNA分子时,可形成()。A.两端相同的线性DNA,有黏性末端B.两端相同的线性DNA,无黏性末端C.两端不同的线性DNA,一端有黏性末端,一端无黏性末端D.两种末端无法判断解析不同限制性核酸内切酶切割位点是不相同的,DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式,即黏性末端和平末端。如果是限制酶EcoRⅠ,则在它识别序列的中心轴线两侧进行切割,产生黏性末端;如果是限制酶SmaⅠ,则在它识别序列的中心轴线处切割,产生的是平末端。[来源:数理化网][来源:数理化网]答案A2.右图为表达载体的模式图, 若结构X是表达载体所必需的, 则X最可能是()。A.氨苄青霉素抗性基因B.启动子C.限制酶D.DNA连接酶解析启动子是该表达载体所必需的,功能是启动插入基因的转录过程。氨苄青霉素抗性基因可以作为标记基因,但不是必须用它作标记基因。限制酶和DNA连接酶都不是表达载体所需要的。答案B3.(2012·北京-黄冈冲刺卷)如图是利用基因工程技术培育转基因植物,生产可食用疫苗的部分过程示意图,其中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ为四种限制性内切酶。下列说法错误的是()。A.图示过程是基因工程的核心步骤B.表达载体构建时需要用到限制酶SmaⅠC.抗卡那霉素基因的存在有利于将含有抗原基因的细胞筛选出来D.除图示组成外,表达载体中还应该含有启动子和终止子等结构解析图示过程为基因表达载体的构建过程,是基因工程中的核心步骤。构建过程中需要将目的基因完整切割下来,此时要用到限制酶PstⅠ、EcoRⅠ。抗卡那霉素基因是标记基因,目的是便于鉴定和筛选含有目的基因的细胞。基因表达载体包括启动子、目的基因、终止子和标记基因等。答案B4.下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因,ampR表示氨苄青霉素抗性基因,BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点。[来源:数理化网]据图回答下面的问题。(1)图中将人乳铁蛋白基因插入载体,需用________限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含________的培养基上进行。(2)能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是________(填字母代号)。A.启动子 B.tetRC.复制原点 D.ampR(3)过程①可采用的操作方法是________(填字母代号)。A.农杆菌转化 B.大肠杆菌转化C.显微注射 D.细胞融合[来源:](4)为检测人乳铁蛋白是否成功表达,可采用________(填字母代号)技术。A.核酸分子杂交 B.基因序列分析C.抗原-抗体杂交 D.PCR解析(1)由图示可知:需用HindⅢ和BamHⅠ限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因,因酶切后tetR四环素抗性基因结构被破坏而ampR结构完好,故用含氨苄青霉素的选择培养基可筛选含有重组载体的大肠杆菌。(2)启动子是一段特殊的DNA序列,是RNA聚合酶识别和结合的位点,可调控基因的特异性表达。(3)过程①表示把重组载体导入受体细胞的过程,当受体细胞为动物细胞时,常采用显微注射法。(4)人乳铁蛋白基因是否成功表达,关键看是否有其表达产物即人乳铁蛋白,可用抗原-抗体杂交法检测该蛋白是否存在。答案(1)HindⅢ和BamHⅠ氨苄青霉素(2)A(3)C(4)C课堂小结 宜城教育资源网www.ychedu.com
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